Nat Commun : JAK2V617F 的克隆造血促进动脉高压，肺中性粒细胞中 ALK1 上调

肺部动脉高压（PH）是一种复杂的心肺部结核病，其构造是肺部血管壁阻力和肺部动脉阻力上升。 尽管在在在诊断和治疗方面取得了实质连续性，但 PH 即使如此是一种情况严重的结核病，最终不会随之而来有着高比率的右心衰竭。PH 的病理构造是小肺部动脉的结构重塑，这与内膜增厚、脊柱化和丛状病癫痫的转变成有关。 肝脏 (BM) 共通的祖细胞核以及血管壁远处炎癫痫诱发有助肺部动脉重塑的过程。肝脏增生连续性 (MPN)患儿的 PH 引发率大于一般成年人，并且在 MPN 患儿当中推论到因心血管壁结核病随之而来的高比率。根据 WHO 流行病学分类，PH 分为五个类。 基于上述推论，MPN 相关 PH 被归类为 WHO 第V 两组（较更少研究课题），这是一个重要的异质两组，包含不清楚的多各种因素机制。 MPN 包括真连续性淋巴细胞核激增癫痫 (PV)、继发连续性血小板激增癫痫 (ET) 和继发连续性肝脏纤维化 (MF)，其构造是萌芽肝脏细胞核的慢连续性诱导，而肝脏诱导表型是由 JAK2、CALR 和 MPL 的体细胞核变异驱动的。在 MPN 当中，JAK2V617F 是 JAK2 当中的一种激活体细胞核变异，是都可推论到的驱动变异； 它已在超过 95% 的 PV 患儿以及 50-60% 的 ET 和继发连续性 MF 患儿当中推论到。 JAK2V617F 随之而来 JAK-STAT 闭环的细胞核因子非依赖连续性激活，随之而来萌芽髓细胞核诱导。 MPN 患儿常体现出静脉和动脉血管壁并发癫痫。特别是，与有着其他驱动变异的患儿相对于，有着 JAK2V617F 的 MPN 患儿揭示出较高的血管壁并发癫痫引发率。然而，沃克连续性肝脏与 PH 当中 JAK2V617F 的机制相关连续性尚未揭示。 研究课题设计思路： 为了了解 JAK-STAT 闭环在 PH 转型当中的参加，将成年野生型 (WT) C57BL/6 J 豚鼠曝露于慢连续性窒息 (10% O2)，全肺部匀浆而非分开细胞核上的 STAT3 腺苷水平夙着上升，表明 JAK-STAT 激活可能在慢连续性窒息诱导的 PH 当中发挥病理生理功用。为了揭示 JAK2V617F 表达对 PH 中风机制的不良影响，该研究课题用到了 Jak2V617F21 在曝露于常氧或慢连续性窒息后转连续性状表达 Jak2V617F21 的雌连续性豚鼠。在常氧曝露后，与 WT 同窝仔鼠相对于，JAK2V617F 豚鼠的粒细胞核和血小板总和夙着较高，表明 JAK2V617F 豚鼠的 MF 样表型。JAK2V617F 豚鼠体现出肺部血管壁重构，伴随着慢连续性窒息后肺部血管壁远处；也淋巴细胞核诱发上升。该研究课题最后研究课题了肝脏细胞核沃克，检查是否是通过 BM 复制（BMT）增进了 PH 的转型。将来自 JAK2V617F 豚鼠或比对 WT 豚鼠的酪氨酸 BM 细胞核麻醉到经致命连续性辐射的受体 WT 豚鼠当中，以便受体豚鼠有着 WT 肺部。除此以外的是，与其他两组相对于，拥护慢连续性窒息的 JAK2V617F-BMT 豚鼠肺部当中的弹连续性蛋白酶活连续性、；也淋巴细胞核相关STAT和STAT受体以及细胞核因子夙着升温。为了在肺部动脉重塑当中对载有 JAK2V617F 的 BM 共通肝脏细胞核展开可视化和更进一步表征，该研究课题通过将 JAK2V617F 豚鼠与 CAG-EGFP 豚鼠育种显现出了双转连续性状豚鼠（JAK2V617F/CAG-EGFP 豚鼠）。将来自 JAK2V617F/CAG-EGFP 豚鼠或比对 WT/CAG-EGFP 同窝仔鼠的 BM 细胞核复制到经致死照射的 WT 豚鼠当中。在 BMT 曝露于慢连续性窒息 3 再一，免疫染色揭示 GFP+ 细胞核在复制了来自 JAK2V617F/CAG-EGFP 豚鼠（JAK2V617F-GFP-BMT）的 BM 细胞核的 BMT 受体的肺部动脉区域当中大量积累。 最后用到不同比例的 WT-GFP 或 JAK2V617F-GFP BM 细胞核和并未 GFP BM 细胞核的 WT 的混合物展开了竞争连续性复制。在比对非竞争连续性两组当中，流式细胞核拳法揭示，与 100% WT-GFP-BMT 和 100% JAK2V617F-GFP- 4 周时相对于，血清当中 CD45+ 细胞核内 GFP+ 细胞核审核的嵌合现象在 8 周时夙着升温。 最后研究课题从 WT-GFP-BMT 和 JAK2V617F-GFP-BMT 豚鼠的肺部和血清当中分开出细胞核其余部分，在 BMT 后 8 周有着 1-19% 的嵌合现象。 JAK2V617F-GFP-BMT 豚鼠 Ly6G+ ；也淋巴细胞核当中 GFP+ 细胞核的总和在肺部当中夙着大于血清当中，而 WT-GFP-BMT 豚鼠在肺部和血清当中的总和并未差异。为了揭示载有 JAK2V617F 的 BM 共通的；也淋巴细胞核如何与 PH 转型有因果关系的潜在机制，通过 RNA 测序在来自 BM、外周血 (PB) 和肺部的分选 Ly6G+ 细胞核当中对；也淋巴细胞核的几个变异阶段性展开了连续性状表达谱量化JAK2V617F 豚鼠与 WT 豚鼠的比较。连续性状集富集量化揭示，与 WT 豚鼠相对于，JAK2V617F 豚鼠；也淋巴细胞核变异的每个阶段性的经典 IL6-JAK-STAT3 闭环大多降至。 为了研究课题 JAK2V617F 对 ACVRL1 的调控机制，量化了杂合 JAK2V617F 敲入 (JAK2V617F/+) HCT116 细胞核系。与 JAK2+/+ 细胞核相对于，JAK2V617F/+ 细胞核当中 STAT3 的腺苷水平夙着升温。该研究课题量化了 ALK1 的可抑制是否是可以更佳 JAK2V617F 豚鼠当中慢连续性窒息诱导的 PH。 K02288，一种 ALK1/230,31 的无机化学可胺，明夙降低了慢连续性窒息曝露的 JAK2V617F 肺部以及 JAK2V617F/+ HCT116 细胞核当中 Smad1/5/8 的腺苷水平。为了揭示 PH 当中 JAK2V617F 沃克肝脏的流行病学相关连续性，该研究课题前瞻连续性地招募了 PH 患儿，并通过等位连续性状特异连续性量化 PCR 量化检查了 70 名 PH 患儿当中 JAK2V617F 沃克肝脏的患病率 。引人注目的是，我们见到 7.1% 的 PH 患儿（n = 5）在外周粒细胞核当中揭示 JAK2V617F 体细胞核变异，夙着大于年龄和连续性别匹配的比对受试者。这些原始数据表明，无论血细胞核总和或 PH 情况严重素质如何，JAK2V617F 的沃克肝脏与该变异体载有者当中 PH 的引发和转型有关。 社论出处：Kimishima Y, Misaka T, Yokokawa T, Wada K, Ueda K, Sugimoto K, Minakawa K, Nakazato K, Ishida T, Oshima M, Koide S, Shide K, Shimoda K, Iwama A, Ikeda K, Takeishi Y. Clonal hematopoiesis with JAK2V617F promotes pulmonary hypertension with ALK1 upregulation in lung neutrophils. Nat Commun. 2021 Oct 26;12(1):6177. doi: 10.1038/s41467-021-26435-0. PMID: 34702814.